附件5
缺血修饰白蛋白测定试剂盒
注册技术审查指导原则
（2016年修订版）
本指导原则旨▲在指导注册申请人对缺血修饰白蛋白测定试剂盒注册〒申报资料的准备▓及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指导原则是对缺血修饰白蛋白测定试剂盒的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依〗据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行╲充实和细化。
本指导原则↓是供申请人和审查人员使用的「指导文件，不涉及注№册审批等行政事项，亦不作为法规强制执↘行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资∏料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进〖行调整。
一、适用范围
本指导原则主要针对利用白蛋白钴结合试验（Albumin Cobalt Binding Test, 简称ACB法)间接测算结果的试【剂，从方法学考虑，本文主要№指采用比色法，利用』全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室对人体血清中缺血修饰白蛋白进行定量检测的试剂。基于其他方法学的缺血修饰白蛋白测定试剂可参照本指导原则，但应根据产Ψ品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，应另行选择适用自身方法学特性的研究步骤及方法。依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）、《食品药品监管总局关于印发体外⌒ 诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号），缺血修饰白★蛋白测定试剂盒管理类别为Ⅱ类，分类代号为6840。
二、注册申报材』料要求
（一）综述资料
综述资料︻主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》和《关于公布体外诊断试■剂注册申报资料基本要求和批准证∞明文件的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求，下面着重介绍与缺血修饰白蛋白︾测定试剂盒◥预期用途有关的临床背景情况。
缺血修饰白蛋白（Ischemia Modified Albumin，IMA）测定可用于急性冠状动脉综ω 合征（Acute Coronary Syndrome，ACS）的排除诊断及危险性分层。心肌缺血时,IMA可在数分钟内升高,缺血缓解后6—12h左右回到基础水平，故IMA的升高被认为是心肌缺血的早期诊断指标之〇一，亦可对判断预后提供参考。
此外，非冠脉≡缺血（如耐力运动■后24—48h）、脑缺血（卒中）、某些肿瘤、急性感染、终末期』肾病、肝硬化◥等情况可出现IMA升高。
（二）主要原材料研〇究资料（如需提供）
主要原材料研究资料包括主要反应成分、质控品（如产品包含∮）、校准品（如产品包含）等的选择、制备及其质量标准的研究资料，质控品、校准品的定值试验资料，校准品的溯源性文件，包括溯源链、具体实验方法、数据及↙统计分析等详细资料。
（三）主要生产工艺及反应体系的研究资料（如需提供）
主要工艺包▂括：配制、分装等描述及确定Ψ依据，应包含产◥品的工艺流程图和关键控制点；反应体系包括样々本采集及处理、样本要求、试剂用量、反应条件（温度、时间等）等研□究资料。不同适用机型的反应条件如果有差异应分别详述。
（四）分析性能评估资料
企业应提交在产品研制阶段对试剂进行的所有性能验证的研究资料，包括具体研究方法、试验数据、统计方法等详细资料。对于本↘试剂，建议着⊙重对以下分析性能进行研究。
1.试剂空白吸光度
用试」剂测定空白样本，记录试剂参数规定读数点主々波长下吸光度值（A），应A≥0.6。空白样本可以用纯【化水或生理盐水。
2.分析灵敏度
用试剂◥测试（73.0—83.0）U/mL范围内的样本，记录在试剂参数规定读数点下的吸光度差值（△A），换算为78.0U/mL的吸光度差值（△A）即为本产品的分析灵敏度。
3.准确度
对测量准确度的评价〖包括：与国家标准】品（和/或国际标准㊣ 品）的偏差分】析、方法学比∩对等方法，企业可「根据实际情况选择合理方法进行研究。
（1）方法学比对
采用参考方法或国内/国际普遍认为质量较好的已上市同类试剂作为参比方法，与拟申报试剂同时检测一批病人样品，从测定结果间的差异了解拟申报试剂与参比方法间的偏倚。如偏倚很小或在允许的误差范围内，说明两检测系统对病人标本测定结果基本相符，对同←一份临床样本的医学解释，拟申报试剂与参比方法相比【不会产生差异结果。
在实施方法学比对前，应分别对拟申报◥试剂和参比试剂进行初▆步评估，只有在确认两者都分别符合各自相关的质量标准后方可进行比↙对试验。方法学比对时应注意质量控制、样本类型、浓度分布范围并对结果进行合理的统计学∑分析。相关系数r2≥0.95，相对偏差应不超过±15%。
（2）测试白蛋○白浓度在（43—47）g/L区间内的40份健康人♀血清样本的IMA值，计算各样本IMA/ALB(白蛋白)的值，比值的95%在1.4—1.8范围内即符合∩要求；当比值中╲有3个或3个以上数值不在1.4—1.8范围内时，应进行120份健康人血清◆样本的实验，比值的95%在1.4—1.8范围内即符合要求。
4.精密度
（1）重复性
测量精密度的评估应至少包括两个浓度水平的样本进行，两个浓度都应在试剂的测量范围内且有一定的临床「意义（医学决定水平），通常选用该检测指标的正常参考区间附近和高值样本（两个浓度都选用高值样本，可能致CV偏小，也不能选用接近最低检出限的样本，可能致CV偏大）。
测量精密度的〖评价方法并无统一的标准可依，可根据不同的◢试剂特征或企业的研究习◆惯进行，前提是必须保证研究的科学√合理性。具体实验方法可以参考相关的CLSI-EP文件或国内有关体外诊断产品性能评估的文件进行。
在重复性条件下，测试（78.0±5.0）U/mL区间样本，重复测试10次，计算测量值的平均值（）和标准差（SD）。按式（1）计算
R:相对极差。
所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。
5.线性范围
建立试剂线性范围所用的样本基质应尽可能与临床实际检测的样本相似，理∮想的样本为分析物浓度达到预期测定上限的样本，且应充分考虑多倍稀释对■样本基质的影响。一般在预期测定范围◢内选择5—7个浓度水⌒ 平进行测试，试剂（盒）线性区︻间应覆盖[40.0，120.0]U/mL：
（1）用接¤近线性区间下限的样本稀释接近线性区间上限的样本，混合成至少5个稀释浓度（xi）。用试剂（盒）分别测试以上样本，每个稀释浓度测试3次，分别求出每个稀释浓度检测结果的均值（yi）。以稀释浓度（xi）为自变量，以检测╳结果均值（yi）为※因变量求出线性回归方程。计算线性回归的相●关系数（r），线♂性相关系数︱r︱应不小于0.995；
（2）用（1）中稀释浓度（xi）代入线性ξ回归方程，计算yi测试均值与相应估计值的相对偏差或绝对偏差，在[40.0—120.0]U/mL 区间内，线性相对偏差应不超过±10％。
6.分析特异性
对样本中常见干扰物质，如抗凝物质、溶血（血红蛋白）、高脂、高胆红素等进行检测，确定可接受干扰物质①的最高限值。
7.校准品溯源及质▲控品赋值
应参照GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物※样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供企业（工作）校卐准品及试剂盒配套校准品定值及不确定度计算ㄨ记录，提供质控品赋值及其靶值范围确定的记录。
8.其他需注意问题
对于适用多个机型的产品，应提供如产品说明书【适用机型】项中所列的所有型号仪器的性能评估资料。
（五）参考值（区间）确定资料
应提交验证阳性判断值或者Ψ 参考区间所采用样本来源及详细的试验资料。
应明确参考人群的筛选标准，研究各组（如性别、年龄等）例数不应低于120例。
参考值研究结果应在说明∏书【阳性判断值或者♂参考区间】项中进行相应说明。
（六）稳定性研究资料
包括至少三批样品在实际储存条件下保存至成品有效期后的实时稳定性研究资料，并应当充分考虑产品在储存、运输和使用过程中的不利条件，进行相应的稳定性研究。应当详细说明稳定性研究方法的确定依据及具体试验方法、过程。
本试剂用于对心肌缺血性疾病的辅助判断，而心※肌缺血时，IMA可在数分钟内升高,缺血缓解后6—12h左右回到基础水平，故样本稳定性的研究对↘于实验的成败也至ぷ关重要，因此，应提供⌒对样本贮存条件、存放时间等方面的详细研究资料。适于冷冻保存的样本还应对冻融次数进行评价。
（七）临床评价资料
临床研究资料应符合《关于发布体外诊断试剂临床试验技术指导原则的通告》（国家食品药品监督管理总局通告2014年第16号）的要求，同时研究资料的形式应符合《体外诊断试〖剂注册申报资料要求和批准证明文件格式↘》中临床研㊣ 究资料有关的规定。下面仅对临床实验中的基本问题进行阐述。
1.研究方法
选择境内已批准上市的「性能相近的同类产品作为参比试剂，采用拟申报产品与之进行对比试∑ 验研究，证明本品与已上市产品等效或优于已上市产品。建议企业尽量选择方法学相同、线性范围及精密度等性能接近的同类试剂作为参比试剂。
2.临床研究单位的选々择
应选择至少两家获得国家食品药品监督管理总局资质认○可的医疗机构，临床研究单←位实验操作人员应有足够的时间【熟悉检测系统的各环节（试剂、质控及操作程序等），熟悉评价方案。在整个实验中╲，考核试剂和参比试剂都应处于有效的质量控制下，定期对仪器进行校准、保养，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性。
3.临床试验方案
临床试验实施前，研究人员应从流行病学、统计学、临床医学、检验医↑学等多方面考虑，设计科学合理的临床研究方○案。各临床研究机构的方案设置应〓基本一致，且保证在整个临床试验过程中遵循预定的方〗案实施，不可ζ随意改动。整个试验过程应在临床研究机构的实验室内并由本实验室的技术人员操作完成，申报单位的技术人员除进行必要的技术指导外，不得随意干涉实验进程，尤其是数据收集过程。
试验方案中应确定严格的病例纳入/排除标准，任何已经入选的病□例再被排除出临床研究都应记录在☉案并明确说明原因。在试验操作过程中和判定试验结果时应采用盲法以保证试验结果∞的客观性。临床试验中所涉及的样本类型〖应与产品说明︻书一致，且不应超越参比试剂对样本类型的检测要求， 开展体外诊断试⌒ 剂临床试验，申请人应当按照试验用体外诊断试剂的类别、风险、预期用途等特性，组织制定科学、合理的临床试验方案。一般应当包括以下内容：
（1）一般信息（包括产品信息、临床试验开展的时间和人员等相关信息、申请人相关☆信息等）；
（2）临床试□ 验的背景资料；
（3）试验目的；
（4）试验设计；
（5）评价方法；
（6）统计方法；
（7）对临床♂试验方案修正的规定；
（8）临床试验涉及的伦理问题和说明、《知情同意书◢》文本（如有）；
（9）数据处理与记录保』存;
（10）其他需要说明的内容。
4.研究对象的选择
选择具有特定症状/体征人群作为研究对象。企业在建立病例纳入标准时，应考虑到不同人群的差异，尽量覆盖各类适用人群。在进→行结果统计分析时，建议对各类人群分别进行数据统计分析。总体样本数不少于200例，样本选择应覆盖线性范围，充分考■虑异常值样本，异常▂值样本数不少于60例。
血清应明确存储条件、可否冻融等要求及避免使用的≡样本。实验中，尽可能使用新鲜样本，避免贮存，如无法避免使用贮存样品时，注明贮存条件及时间，在数据分析时应考虑其影响。
样本中待测物浓度应覆盖考核试剂线性范围，且尽可能均匀分布。
申报的样本类型均应在临床试验中进行验证。如果⌒声称可检测其他样本，则每增加一种具有可比性的▲样本类型，相应样本类型的试验例数应〓增加不少于100例。如产品发生涉及检测条件优化、增加与原样本类型具有可比性的其他样本类型等变更事项，临床样本总数至少为100例，并在至少2家（含2家）临床试验机构开展临床※试验；变更主要原材料的供应商、参考区间的变化及增加临床适应症等变更事项，应根据产品具体变更情况，酌情增加临床试验总№样本数。
5.统计学分析
对临床试验结果★的统计应选择合适的统计方法，如㊣ 相关分析、线性回归等。建议统计学负责人选择合理◥的统计学方法进行分↙析，统计分析应可以证▂明两种方法的检测结果无统计学差异。在临床研究方案中应明确统计检验假设，即评价考核试剂与参比试剂是否等效的标准。
6.结果差异样本的验证
在数据收集过程中，对于两种试剂的检测结果有明显差异的样本，应采用临床上普遍认为质量较好的第三种同类试剂进行验★证试验，同时结合患者的临床病情对差异原因及可能结果进行分析。如无需〖复核，应详↘细说明理由。
7.临床试验总结报告△撰写
根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的要求，临床试验报告应该对试验的「整体设计及各个关键点给予清晰、完整的阐述，应该对整个临床试验实施过程、结果分析、结论等进行条理分明的描述，并应包括必要︾的基础数据和统计分析方法。建议在临床总结报告中对以下内容进行详述。
申请人或临床试验牵头单位应对各临床々试验机构的报告进行汇总，并完成临床试验总〓结报告。临床试验报告的〗格式及内容如下：
7.1首篇
首篇是每份临床▽试验报告的第一部分，所有临床试验报】告均应包含该部分内容。
7.1.1封面标题
包括试＠ 验用体外诊断试剂的通用名称、试验开始日期、试验完成日期、主要研究者（签名）、临床试验机构（盖章）、统计学负责人签名及ξ单位盖章、申请人（盖章）、申请人的联系人及联系方式、报告日期、原始资料▲保存地点。
7.1.2目录
列出整个临床ζ 试验报告的内容目录和∮对应页码。
7.1.3研究摘要
对临床试验情况进行简单〓的介绍。
7.1.4试验研究人♀员
列出临床试验主要研究人◣员的姓名、单位、在研究中的【职责及其简历（列于附件中），主要◎研究人员包括主要研究者及各单位的主々要参加人员、统计学负责人、临床试验报告的撰写人。
7.1.5缩略语
临床试验报告中所用的缩略语的全称。
7.2正文内容和报告◥格式◤
7.2.1基本内容
引言。
介绍与临床试验产品有☉关的背景情况：包括（1）被测物的来源、生物及理化□性质；（2）临床预∴期使用目的，所■针对的目标适应症人群，目前针对该适应症所采用的临床或实〗验室诊断方法等；（3）所采用的方法、原理、技术要求等；（4）国内外已批准上市产品的应用现状等。说明申请人和临床试验机构间的合作关系。
7.2.2研究目的。
说明本临床◥试验所要达到的目的。
7.2.3试验管理。
对试验管理结构的描述。
管理结构包括主要研究者、主要参加人员、实验室质量控制□情况、统计/数据管理情况以及试验╳中发生的问题及其处理措施等。
7.2.4试验设计。
7.2.4.1试验总体设∮计及方案的描述。
试验的总体设计和方案的描述应清晰、简洁，必要卐时采用图表等直观的方式。试验进行时方案修改的情况和任何方案以外的信息来源也々应详细叙述。应包括：
（1）临床试验的整体管理情况、临床研究单位选择、临床主要研究人员简介等基本情况介绍；
（2）病例纳入/排除标准、不同年龄段人群的预期选择例数及标准；
（3）样本类型，样本∩的收集、处▓理及保存等；
（4）统计学方法、统计软件、评价统计结果的标准☆
7.2.4.2试验设计及试验方法选择。
试验设计中应包括以下内容：
（1）样本量及█样本量确定的依据。
（2）样本选■择依据、入选标准、排除标准和剔除标准。
（3）样本采集、保存、运输方法等。
（4）对比试剂的确立。
（5）临床试验用所有产品的名称、规格、来源、批号、效期及保存条件》，对比试剂的注册情况。考核试剂和参比试剂的名称、批号、有效期及所用机▅型等信息。
（6）质量控制方法。对质量控制方法进行简要的阐述。试验人▓员培训、仪器ㄨ日常维护、仪器校准、质控品运行情况※，对检测精密度、质控品回收（或测量值）、抽ㄨ查结果评估；
（7）临床试验数据的统计分析方法。对各研究单位的病例数、病种分布情况进行总合，建议以列表或图示方式给出具体例数及百分比↓。
①数据预处理、差异数据的重新检测或第三方验№证以及是否纳入最终』数据统计、对异常值①或缺失值的处理、研究过程中▲是否涉及对方案的修改。
②定量值相∑ 关性和一致性分析
用回归分析验证两种试剂结果的相♂关性，以y=a+bx和R2的形式给出回归分析的拟合方程，其中：y是考核试剂结果，x是参比试剂结果，b是方程斜率，a是y轴截距，R2是判定系数，同时应给出b的95%（或99%）置信区间，定量值结果应无明显统计学差异。
（8）具体ω 试验过程，样本检测、数据收集、样本长期保存『、结果不一致样本∑的校验等。
（9）试验过程中方【案的修改。
一般情▓况下，临床试验㊣ 方案不宜更改。试验过程中对方案的任何修改均应说明，对更改的时间、理由、更改过程及有无备案进行详细阐述并论证其对整个研究结果评价的影响。
7.2.5临床试验结果及分析。
7.2.6讨论和结论。对总体结果进行总结◥性描述并简要分析试验结果，对本次临ζ 床研究有无特别说明，最后得出临床¤试验结论。
7.3有关临床▽试验中特别情况的说明
7.4附件
7.4.1临床试验中所采用的其他试验方○法或其他诊断试剂产品的基本信息，如试验¤方法、诊断试剂产品来源、产品说明书及注册批准情况。
7.4.2临床试验中的所有试验数据，需由临床试验操作者、复核者签字，临床试验机构盖章（封面盖章和骑缝章）。
7.4.3主要参考文献。
7.4.4主要研究︾者简历。
7.4.5申请人需要说明∮的其他情况等。
（八）风险分析研究资料
申请人应○考虑产品寿命周期的各个环节，从预期用途、可能的使用错误〓、与安全性有关的特征、已知及可预见的危害等方面的判定以及对患者风险的估计进行风险分析，应符合YY/T 0316—2008/ISO 14971：2007《医疗器械风险管理对医疗器械的应用》的要求。
（九）拟定产品技术要求
能指标：要求